Il Palazzo dei Penitenzieri, costruito alla fine del XV secolo per volere del cardinale Domenico della Rovere, e attribuito a Baccio Pontelli, ispirato al prospetto di Palazzo Venezia, presenta ambienti interni organizzati attorno a un ampio cortile su doppio livello, con giardino e loggiato. Al piano nobile si trova il salone con il cosiddetto Soffitto dei Semidei, capolavoro del Pinturicchio, decorato da splendide e raffinate formelle in cui l'artista raffigurò creature mitologiche e animali fantastici dai diversi significati filosofici.
Il Palazzo fu detto dei Penitenzieri nel XVII sec. quando divenne abitazione dei Gesuiti, penitenzieri nella vicina basilica di S.Pietro. In occasione dell’apertura di via della Conciliazione furono ritrovati numerosi fregi, decorazioni parietali e iscrizioni murali risalenti al Sacco di Roma. Attualmente è sede centrale dell'Ordine Equestre del Santo Sepolcro di Gerusalemme, istituito nel 1099 da Goffredo di Buglione a difesa del Santo Sepolcro.